Исследования перекрестной защиты после применения живых ослабленных IBV-вакцин Nobilis® IB 4-91 и Nobilis® IB Ma5 (тип "Массачусетс")


подписаться на рассылку анонсов статей:
 
 
поиск по разделу «Статьи»

всего статей: 1517


Исследования перекрестной защиты после применения живых ослабленных IBV-вакцин Nobilis® IB 4-91 и Nobilis® IB Ma5 (тип "Массачусетс")



Др. ветеринарии П. Кюне,
Intervet international BV Boxmeer The Netherlands

1. Введение

Инфекционный бронхит (IB) является общепризнанной причиной потерь в промышленном птицеводстве во всем мире. С тех пор, как болезнь была впервые описана в США в начале 1930-х годов, было отмечено появление большого количества разнообразных серотипов. Складывается впечатление, что за последние годы количество серотипов IB существенно возросло (1,2). Молекулярные исследования показали, что новый серотип IB может появиться в результате самого незначительного изменения аминокислотного состава в S1-части шипа генома этого вируса (3).

В некоторых случаях появление нового серотипа может привести к недостаточной степени защиты после применения вакцин, имеющихся в настоящее время на рынке. Однако имеют место случаи, когда существующие вакцины способны обеспечивать надлежащую меру перекрестной защиты против штаммов IB, не принадлежащих к одному серотипу. Причина такой перекрестной защиты может объясняться тем фактом, что большая часть генома вируса остается неизмененной. Поэтому, с практической точки зрения, может быть более уместным оперировать понятием "протектотип" (12), чем "серотип". Несмотря на очевидность частой перекрестной защиты между серотипами IB, имеются случаи, когда существующие IB-вакцины не обеспечивают адекватную защиту от недавно появившегося серотипа. Одним из таких примеров является недавнее появление серотипа 4-91 (793B) (10,13). Этот серотип создает связанные с заболеванием проблемы у цыплят, привитых штатом "Массачусетс", в Европе и многих других странах (5), и с целью борьбы с инфекциями, вызываемыми этим серотипом, была разработана новая живая ослабленная IB-вакцина.

Принимая во внимание непрерывное появление новых серотипов IB во всем мире, представляется целесообразным оценить уровень перекрестной защиты, достигаемой в результате применения доступных в настоящее время IB-вакцин (6,9), поскольку не всегда возможно или рационально разрабатывать вакцину для каждого нового появившегося серотипа. Очевидно, что в связи с наличием новых антигенных типов существует настоятельная потребность в углублении и дополнении имеющейся информации, которая касается степени защиты, обеспечиваемой различными программами вакцинации, применяющими различные типы вакцин против изолятов IB из различных частей земного шара. Это и было задачей исследования, представляемого вниманию читателя. В данном исследовании с помощью цилиостазного теста (4,7) оценивалась способность двух зарегистрированных вакцин компании "Интервет" защищать от заражения.

Трахея снабжена защитным механизмом, предназначенным для защиты от внедрения патогенов этим путем. Этот механизм известен под названием "реснитчатого аппарата". Поверхность трахеи покрыта особыми эпителиальными клетками, которые выстилаются многочисленными подвижными структурами в виде волосков, называемыми ресничками. Из-за своей способности к движению эту структуру можно представить, как поле пшеницы на ветру. Размещенные между ресничками секреторные клетки называются "бокаловидными клетками". Продуцируемая этими секреторными клетками слизь служит в качестве ловушки для чужеродных частиц и, затем, посредством скоординированного движения ресничек, чужеродный материал удаляется. Очень существенным является вклад реснитчатого аппарата в борьбу со вторичными респираторными патогенами (например, E. coli, Aspergillus sp. и др.). Потеря ресничек приводит в результате к значительному нарушению защитной способности дыхательной системы. Соответственно, вакцинный вирус должен оказывать незначительное негативное воздействие на этот важный механизм защиты от заболевания. Воздействие вируса на слизистую оболочку трахеи можно оценить с помощью цилиостазного теста. Этот тест также применяется для оценки степени защиты после вакцинации. У вакцинированной птицы, впоследствии подвергшейся заражению, в случае наличия защиты слой ресничек остается активным.

2. Материалы и Методы

2.1. Штаммы вируса

Штаммы вируса IBV, использованные в ходе экспериментального заражения, были изолированы с применением обычных методик (11) во время вспышек заболеваний у цыплят на птицефермах промышленного типа. Как было показано в ходе серологической реакции нейтрализации в культурах ткани трахеи (8), в антигенном плане все они отличались от двух используемых вакцин против инфекционного бронхита: Nobilis® IB 4-91 и Nobilis® IB Ma5 (тип "Массачусетс"). Они использовались в экспериментах по заражению в дозе приблизительно log10 3.0 средней цилиостатической дозы (CD50) в виде глазных капель по 0,1 мл.

2.2. IB вакцины

Вакцины Nobilis® IB 4-91 и Nobilis® IB Ma5 (тип "Массачусетс") использовались в виде глазных капель согласно рекомендациям Intervet International BV.

2.3. Дизайн исследования

Для каждого эксперимента были использованы группы из 10 цыплят линии "SPF" ("свободных от специфических патогенов"). В Группе 1 вакцинировали вакциной Nobilis® IB Ma5 в возрасте 1 день, Группе 2 - Nobilis® IB 4-91 в возрасте 14 дней, тогда как цыплят в Группе 3 вакцинировали в возрасте 1 день вакциной Nobilis® IB Ma5 ( тип " Массачусетс") и в 14 дней - Nobilis® IB 4-91, а Группа 4 была оставлена без вакцинации, и она служила в качестве отрицательного контроля. Всех цыплят заражали в возрасте 5 недель. Степень защиты оценивали через 5 - 7 дней после заражения с помощью цилиостазного теста. Во все эксперименты были включены группы вакцинированных цыплят, зараженных гомологическим серотипом IB.

2.4. Оценка степени защиты

В наших экспериментах цилиостазный тест проводили следующим образом. Вкратце, через 5-7 дней после заражения цыплят умерщвляли путем передозировки барбитурата внутривенно и изымали трахею. Нарезали 10 тонких колец (по 3 из верхней и нижней части и 4 - из центральной части трахеи), которые рассматривали при малом увеличении под микроскопом. Активность ресничек оценивали по шкале от 0 (биение всех ресничек) до 4 (отсутствие биения ресничек). Цилиостазная оценка для каждой птицы состояла из общей оценки всех 10 обследованных колец, при максимальной оценке 40, когда наблюдался полный цилиостаз. Оценка менее "20" указывала на защиту. Оценку цилиостаза можно было также рассчитать в процентах путем деления средней оценки для группы вакцинированных и позднее зараженных цыплят на среднюю оценку контрольной группы и умножения на 100. Чем ниже оказывалась оценка, тем более высокую степень защиты обеспечивала примененная вакцинация (7). С целью более четкого представления о конечной степени защиты в процентах, в данном исследовании оценка цилиостаза в процентах (полученная как описано чуть выше) вычиталась из 100. В таком случае оценка цилиостаза, полученная в не вакцинированных цыплят представляет собой процент защиты, равный нулю ("0").

3. Результаты

После заражения гомологичными штаммами цыплят вакцинированных групп защита была полной (данные не показаны). Результаты исследования перекрестной защиты представлены в Табл. 1 и следующих ниже рисунках. Очевидно, что при гетерогенном заражении, в большинстве случаев, применение обеих вакцин IB типа " Массачусетс" (Ma5) и 4-91 в ходе программы вакцинации обеспечило намного лучшую перекрестную защиту, чем применение только одной из этих вакцин. Два четких примера этого явления можно было заметить в экспериментах, включающих заражение штаммами из Южной Африки и с Тайваня. Южноафриканский штамм был изолирован в 1980 г. и, как известно, в настоящее время присутствует в той стране. Ранее было показано (14), что не удается добиться защиты от изолята с Tайваня при применении вакцины "H120". В обоих случаях примененные по отдельности вакцины не были способны обеспечить надлежащий уровень защиты, тогда как превосходный уровень перекрестной защиты достигался, когда обе эти вакцины (Ma5 и 4-91) были включены в программу вакцинации. Это также относится к голландскому изоляту D1466. Этот штамм, который относится к серотипу D212, был первоначально изолирован в Нидерландах в начале 1980 гг. и в настоящее время считается ответственным за большинство проблем в этой стране, связанных с инфекционным бронхитом (de Wit, частная переписка). Известно также, что этот штамм не является близкородственным другим известным серотипам IB. Это дальнее родство приводит в результате к низкому уровню перекрестной защиты при использовании вакцин на основе других серотипов. В наших экспериментах наилучший уровень перекрестной защиты от штамма D1466 также был достигнут, когда были применены обе вакцины Ma5 и 4-91. Учитывая особенности штамма D212/D1466 и достигнутую в наших экспериментах среднюю оценку после заражения < 20, зараженную группу цыплят можно считать вполне защищенной. В других случаях при применении по отдельности, как IB Ma5 (например против изолятов из Арканзаса, Бразилии и Японии), так и IB 4-91 (например против изолятов из Италии и Японии) оказалось возможным обеспечить превосходную защиту от заражения штаммами, различными в антигенном плане.

4. Заключение

В последние годы большое внимание уделяется определению специфического серотипа новых изолятов вируса IB. Эта информация имеет особую ценность в научном плане и, в частности, для понимания эпидемиологии инфекций IB. По мере распространения различных антигенных типов вируса IB по всему миру, все более усложняется проблема разработки программ вакцинации против новых серотипов. Более того, как свидетельствуют представленные в данной статье результаты, нежелательно, да и нецелесообразно стремиться к разработке новых живых ослабленных вакцин для каждого нового появляющегося серотипа IB. Наши результаты подтверждают оправданность концепции протектотипов, которая с практической точки зрения является более уместной, и показывают, что применительно к инфекционному бронхиту, защита in vivo является намного более широкой, чем можно было бы полагать на основе результатов серологической реакции нейтрализации in vitro.

Представленные результаты однозначно показывают, что применение двух живых ослабленных вакцинных штаммов IB 4-91 и Ma5, разработанных для различных серотипов IB, значительно расширяет степень защиты от заражения целого ряда различных в антигенном плане вирусов IB, распространенных во всем мире. Повышение степени перекрестной защиты от изолятов, принадлежащих к антигенно различным серотипам, может в особенности быть достигнуто, если в возрасте около 2 недель проводится ревакцинация с применением лицензированной IB-вакцины с серотипом, отличным от того, который был использован при первой вакцинации. У цыплят-бройлеров вакцинация против инфекционного бронхита обычно проводится у суточных цыплят. Защита, обеспечиваемая однократной вакцинацией, может оказаться недостаточной для того, чтобы охватить весь продуктивный период. В таких ситуациях очень полезным может оказаться проведение второй вакцинации не только с целью продления срока действия достигнутой защиты, но и для расширения спектра такой защиты.

Перекрестная защита, обеспечиваемая живыми ослабленными вакцинами против гетерогенных штаммов инфекционного бронхита.



5. REFERENCES

  1. Anon. Proceedings of I. International Symposium on Infectious Bronchitis, Rauischholzhausen, Giessen, Germany. Ed E.F.Kaleta and U.Heffels- Redmann, Deutsche Veterin‰rmedizinische Gesellschaft e.V. 1988.
  2. Anon. Proceedings of II. International Symposium on Infectious Bronchitis, Rauischholzhausen, Giessen, Germany. Ed E.F.Kaleta and U.Heffels- Redmann, Deutsche Veterin‰rmedizinische Gesellschaft e.V. 1991.
  3. Cavanagh, D. The coronavirus surface glycoprotein. In: The coronaviruses. Ed. S.G.Siddell, Plenum Press, New York. pp 73-113. 1995.
  4. Cavanagh, D., M.M.Ellis, and J.K.A. Cook. Relationship between sequence variation in the S1 spike protein of infectious bronchitis virus and the extent of cross-protection in vivo. Av. Path. 26: 63-74. 1997.
  5. Cook, J.K.A., S.J. Orbell, M.A. Woods, and M.B. Huggins. A survey of the presence of a new infectious bronchitis virus designated 4/91 (793B). Vet. Rec. 138: 178-180. 1996.
  6. Cook, J.K.A., S.J. Orbell, and A. Malo. Protection provided by liveattenuated infectious Bronchitis vaccines against challenge with different Серотип IB s. Proceedings of the International Symposium on Infectious Bronchitis and Pneumovirus Infections, Rauischholzhausen, Giessen, Germany. Ed E.F.Kaleta and U.Heffels- Redmann, DeutscheVeterin‰rmedizinische Gesellschaft e.V. 1998.
  7. Cubillos, A., J. Ulloa, V. Cubillos, and J.K.A. Cook. Characterisation of strains of infectious bronchitis isolated in Chile. Av. Path. 20: 85- 99. 1991.
  8. Darbyshire, J.H., J.G. Rowell, J.K.A. Cook, and R.W. Peters. Taxonomic studies on strains of infectious bronchitis using neutralisation tests in tracheal organ cultures. Archiv. Virol. 61: 227-238. 1979.
  9. Gelb, J., J.B. Wolff, and C.A. Moran. Variant серотип s of Infectious Bronchitis virus isolated from commercial layer and broiler chickens. Av.Dis. 35: 82-87. 1991.
  10. Gough, R.E., C.J. Randall, M. Daglass, D.J. Alexander, W.J. Cox, and D. Pearson. A ?new? strain of infectious bronchitis virus infecting domestic fowl in Great Britain. Vet. Rec. 130: 493-494. 1992.
  11. King, D.J., and D. Cavanagh. Infectious bronchitis. In: Diseases of poultry, 9th ed. M.S. Hofstad, H.J. Barnes, B.W. Calnek, W.M. Reid, and H.W. Yoder, Jr., eds. Iowa State University Press, Ames, Iowa. pp. 471-484. 1991.
  12. Lohr. J.E. Differentiation of IBV strains. In: Proceedings of I. International Symposium on Infectious Bronchitis, Rauischholzhausen, Giessen, Germany. Ed E.F.Kaleta and U.Heffels-Redmann, Deutsche Veterin‰rmedizinische Gesellschaft e.V.Deutsche Veterin‰rmedizinische Gesellschaft e.V. pp. 199- 207.1988.
  13. Parsons, D., M.M. Ellis, D.Cavanagh, and J.K.A. Cook. Characterisation of an infectious bronchitis virus isolated from IB-vaccinated broiler breeder flocks. Vet. Rec. 131: 408-411. 1992.
  14. Wang, C-H., M-C. Hsieh and P-C. Chang. Isolation, pathogenicity and H120 peotection efficiency of infectious bronchitis viruses isolated in Taiwan. Av. Dis. 40: 620-625. 1996.






 

администрация сайта: ООО «Фаулер»
ждем ваших писем: deneb@webpticeprom.ru

 
птицеводство
Webpticeprom птицеводство
  1. Главная
  2. Статьи про птицеводство
  3. Болезни и лечение птиц
  4. › Исследования перекрестной защиты после применения живых ослабленных IBV-вакцин Nobilis® IB 4-91 и Nobilis® IB Ma5 (тип "Массачусетс")
 
Болезни и лечение птиц
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
на сайте страниц: 13122